Mantar Diaqnostik Testi

Göbələklər (göbələklər) təbiətdə geniş yayılmışdır. Bu günə qədər təxminən 400.000 növ təsvir edilsə də, onlardan yalnız 100-150-si insanlarda infeksiyaya səbəb ola bilər. Göbələklərin yaratdığı xəstəliklərə mikoz deyilir. Göbələkləri və göbələk xəstəliklərini öyrənən elm sahəsinə mikologiya deyilir.

Göbələklər eukaryotik quruluşa malik mikroorqanizmlərdir. Tərkibində xlorofil olmadığı üçün fotosintez edə bilmirlər və bu xüsusiyyəti ilə bitkilərdən fərqlənirlər. Onlar fakultativ anaeroblar və ya məcburi aeroblardır. Göbələklər heterofil mikroorqanizmlərdir, yəni karbon və enerji mənbəyi kimi üzvi birləşmələrdən istifadə edirlər. Onlar hidrolitik fermentləri xarici mühitə buraxaraq qidaları həzm edirlər və həzm olunan qidaları absorbsiya yolu ilə hüceyrələrə aparırlar.

Bəzi göbələklər kapsuldur və polisaxarid quruluşa malikdir. Kapsul polisaxarid ən azı üç müxtəlif polimerdən ibarətdir: qlükuronoksilomannan, qalaktoksilomannan və mannoprotein. Göbələklərdə hüceyrə divarının 90%-i xitin, qlükan, mannan və xitozan kimi polisaxarid polimerlərdən, 10%-i isə zülallar, qlikoproteinlər və lipidlərdən ibarətdir. Polisaxaridlərin növü və miqdarı göbələk növündən asılı olaraq dəyişir. Hüceyrə divarı hüceyrəyə öz formasını verir, onu osmotik şokdan qoruyur, antigendir və tərkibində bəzi fermentlər olduğu üçün fizioloji aktivliyə malikdir. Hüceyrə membranı məməlilərin membranlarına bənzər fosfolipidlər, zülallar və sterollardan ibarət ikiqatlı bir quruluşdur. Məməlilərin membranından fərqli olaraq, xolesterin əvəzinə erqosterol və zimosterol ehtiva edir. Hüceyrə membranının funksiyalarına sitoplazmanı qorumaq, maddə mübadiləsini tənzimləmək, kapsul və divar sintezinə kömək etmək daxildir. Bu gün terapevtik məqsədlər üçün istifadə edilən antifungal qrup dərmanlarının əksəriyyətinin hədəf yeri membranda yerləşən erqosteroldur.

Göbələk sporları çoxalma üçün cavabdehdir. Çoxalma cinsi sporlar (ziqospor, askospor, basidiospor), aseksual sporlar (blastospor, artrospor, xlamidospor, makrokonidium, mikrokonidium, sporangiospor) və ya paraseksual yolla baş verir. Göbələklərin elmi təsnifatı cinsi sporlara əsaslanır. Morfoloji görünüşünə görə; İki yerə bölünür: mayalar (Candida, Saccharomyces və s.) və qəliblər (Ascomycetes, Zygomycetes, Deuteromycetes və s.).

 

Diaqnostik Testlər

Müxtəlif növ göbələklərin təcrid edilməsi və identifikasiyası kultura əsaslı və mədəniyyətə əsaslanmayan (seroloji, molekulyar) üsulların tətbiqi ilə həyata keçirilir. Göbələk əleyhinə müalicəyə başlamazdan əvvəl klinik nümunələr aseptik şəraitdə toplanmalı, formalin içərisinə qoyulmamalı və material üçün ən uyğun daşıyıcı mühitə malik steril qablarda laboratoriyaya çatdırılmalıdır.

Uzun müddət olduğu üçün. Mədəniyyət nəticələrinin əldə edilməsi, birbaşa mikroskopik qiymətləndirilməsi böyük əhəmiyyət kəsb edir. Laboratoriyaya göndərilən klinik nümunələr əvvəlcə makroskopik olaraq qiymətləndirilir və mikroskopik qiymətləndirmədə maya və ya kif varlığı haqqında ilkin məlumatlar əldə edilir. Birbaşa mikroskopik müayinədə KOH 10-20-30%, ümumiyyətlə 30% nisbətində istifadə olunur. Dəri və dırnaq qırıntıları, tüklər, tüklər, yunlar, dəri parçaları və s. Xitin təbəqəsini həll etmək və göbələk hiflərini aşkar etmək üçün toplanmış materiallara KOH əlavə edilir. Ləkələnmiş mikroskopik müayinə üçün qram ləkəsi, laktofenol pambıq mavisi, kalkofluor ağ, Hindistan mürəkkəbi, Qrokott-Qomori matamin gümüşü, pirodik turşu-Schiff (PAS), Giemsa, Wright və Mason-Fontana kimi boyalardan istifadə olunur. Ağacın işığı yoluxmuş səthlərdə göbələkləri axtarmaq üçün də istifadə edilə bilər. Nikel oksid filtrindən keçən ultrabənövşəyi şüadır. Bu işıq altında bəzi göbələkləri solğun sarı, yaşıl, sarı flüoresan və mərcan qırmızı flüoresan kimi rənglər verməklə müəyyən etmək olar.

 

Mədəniyyət birbaşa deyil, daha spesifik diaqnostik üsuldur. mikroskopiya. Qəti diaqnoz qoymaq mümkün olmadıqda və ya göbələklərin növünü müəyyən etmək üçün tətbiq edilir. Mədəniyyətin qiymətləndirilməsində koloniyaların morfologiyası və nəticədə piqment rəngi prioritetdir. İstifadə olunan media götürülən klinik nümunədən asılı olaraq dəyişir. Mədəniyyət mediası ilkin izolyasiya məqsədləri və xüsusi məqsədlərə bölünür.

İlkin izolyasiya məqsədləri;

- Sabauraud-dekstroz-agar (SDA) və beyin ürəyi infuziyası agar (BHI); Saprofit və patogen göbələklərin ilkin izolyasiyası üçün istifadə olunur. Qeyri-steril mühitlərdən götürülmüş nümunələr üçün antibiotiklərlə birlikdə SDA və BHI istifadə olunur. Onlar otaq temperaturunda və 37°C temperaturda 1-4 həftə ərzində çoxalır və ümumiyyətlə ağ və ya krem ​​rəngli, yumşaq konsistensiyaya malik olan və adətən mayalı və qoxulu koloniyalar əmələ gətirirlər.

-İnhibitor kif ağarı və Maya ekstraktı fosfat. at agar; Patogen göbələklərin ilkin izolyasiyası.

Xüsusi məqsədlər;

-Tween 80 və tripan mavisi (MUJ) ilə qarğıdalı unu jele; Candida albicans-ın xlamidospor diaqnostikası,

-Pambıq toxumu transformasiyalı agar; Blastomyces dermatitidisin kif fazasından maya fazasına çevrilməsi,

-Czapek agarı; Aspergillus izolyasiyası,

 

Quş toxumu agar (Staib agar); Cryptococcus neoformas izolyasiyası,

-CHROMagar Candida; Candida növlərinin fermentativ reaksiya əmələ gəlməsi əsasında təcrid edilməsi,

-Maya fermentasiya bulyonu; Mayaların fermentasiya xassələri,

-Maya azotlu agar; Mayaların karbohidrat assimilyasiya xüsusiyyətləri.

Bundan əlavə, BACTEC və BacT/Alert üsulları qan kulturalarında göbələklərin aşkarlanmasını sürətləndirir.

Germ-Tube Testi; Bu testdə hüceyrələrdən mikrob borusu əmələ gəlməsi axtarılır. Mayayabənzər mikroorqanizmlərin yüngül suspenziyası 0,5-1,0 ml steril zərdabda hazırlanır və 37°C temperaturda 2-4 saat inkubasiya edilir. Qarışıqdan bir damla slaydın üzərinə qoyulur və örtüklə örtülür. Mikroskop altında mikrob borusunun hüceyrələrdən əmələ gəlib-gəlmədiyi araşdırılır. Bu vəziyyət C. albicans üçün xarakterikdir.

Sistemik göbələk infeksiyalarının seroloji diaqnostikası üçün zərdabda və ya bədən mayelərində göbələk antigenlərini və ya metabolitlərini aşkar etmək üçün aparılan testlər daha dəyərlidir. Anticisimlər lateks aglütinasiyası (LA), ELISA, Ferment İmmuno Analizi (EIA), Radioimmuno Assay (RIA), immunoelektroforez (IE) və immunodiffuziya (ID) üsulları ilə aşkar edilə bilər. Bu üsullarla hüceyrə quruluşunda antigenlər və ya metabolitlər; mannan, D-arabinitol, (1-3)-β-qlukan, polisaxarid qlükoroksilomannan, qalaktomannan və enolaza aşkar edilə bilər.

Molekulyar diaqnostika üsulları getdikcə populyarlaşsa da, onların hər bir klinikada rutin metod kimi tətbiqi Laboratoriya iqtisadi səbəblərdən qaynaqlanır və standartlaşdırma olmaması səbəbindən ümumi deyil. Yoluxucu göbələkləri aşkar etmək və müəyyən etmək üçün nuklein turşusunun gücləndirilməsi və hibridləşmə zondlarından istifadə edərək siqnal gücləndirmə üsullarından istifadə olunur. Nuklein turşusunun gücləndirilməsi texnologiyaları polimeraza zəncirvari reaksiya (PZR) və ya oxşar üsullardan istifadə edir. Mantar yükü çox aşağıdır və kultura və seroloji diaqnostika hələ mövcud deyil. Qeyri-kafi mərhələdə PCR əsaslı diaqnostika üsullarının çox daha təsirli olacağını söyləmək olar. Əks transkriptaza (RT) PCR hədəf RNT-ni gücləndirmək məqsədi daşıyır.

oxumaq: 0

yodax